刺参腐皮综合征病原灿烂弧菌检测探针的制备及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王印庚

作者： 王印庚;张凤萍;李胜忠;陈霞;崔玉龙

作者机构：

关键词： 刺参;腐皮综合征;灿烂弧菌;聚合酶链式反应;斑点杂交

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2009 年 01 期

页码： 119-125

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 腐皮综合征是近年来养殖刺参发生的严重疾病。发病时,刺参大批死亡,经济损失惨重。以其主要致病原灿烂弧菌(Vibrio splendidus)DNA为模板,PCR扩增出16S-23S核糖体RNA基因间隔区序列,插入pMD19-T,转化大肠杆菌DH5α并测序。根据该间隔区序列,设计引物扩增177 bp的地高辛标记的探针。该探针对灿烂弧菌呈现特异性,而对其它细菌V.fluvialis,V.anguillarum,V.alginolyticus,Aeromonas hydrophila,V.harveyi,V.parahaemolyticus,V.vulnificus均呈阴性。探针对灿烂弧菌DNA的检出限为6.25 pg,具有较高敏感度。用该探针对人工感染以及从青岛、烟台、威海获取的腐皮综合征发病海参和养殖水体进行斑点杂交,灿烂弧菌检出率达100%。结果表明,该探针具有良好的特异性和敏感性,可用于快速检测养殖刺参腐皮综合征的病原灿烂弧菌。用该方法检测刺参腐皮综合征尚属首次,为刺参腐皮综合征的快速诊断和防治提供技术支撑。

分类号： S947.9

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