猪细小病毒SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒的研制

文献类型： 中文期刊

第一作者： 余波

作者： 余波;周思旋;谭诗文;徐景峨;史开志;杨莉

作者机构：

关键词： 猪细小病毒;VP2基因;SYBR Green I荧光定量

期刊名称： 湖北农业科学

ISSN： 0439-8114

年卷期： 2015 年 54 卷 01 期

页码： 126-129+133

收录情况： 北大核心

摘要： 根据GenBank中猪细小病毒VP2基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得猪细小病毒VP2基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了猪细小病毒的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法,以此为基础研制出试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对PRV、PCV-2、E.coli、CSFV、PRRSV均无阳性信号扩增,可重复性好,测灵敏度可达1.0×101拷贝/μL。结果表明,研制的猪细小病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等优点,适合于猪细小病毒临床样品的检测。

分类号： S852.651

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