猪圆环病毒2型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 余波
作者: 余波;周思旋;谭诗文;徐景峨;史开志;杨莉
作者机构:
关键词: 猪圆环病毒2型;ORF2基因;SYBR Green I荧光定量PCR
期刊名称: 湖北农业科学
ISSN: 0439-8114
年卷期: 2014 年 53 卷 22 期
页码: 5474-5477+5525
收录情况: 北大核心
摘要: 根据Gen Bank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列设计特异性引物,PCR扩增获得猪圆环病毒2型ORF2基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了猪圆环病毒2型的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法。扩增产物的溶解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对PRV、PPV、E.coli、CSFV、PRRSV均无阳性信号,可重复性好,测灵敏度可达4.0×101拷贝/μL。结果表明,建立的猪圆环病毒2型SYBR Green I实时荧光定量PCR具有特异、灵敏、快速、重复性好,适合于猪圆环病毒2型临床样品的检测。
分类号: S852.651
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