禽分枝杆菌副结核亚种重组蛋白r22-ag85B的表达及纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨金国

作者： 杨金国;王聃;刘慧芳;杜艳芬;司微;赵海玲;林靖凯;王春来;倪红波;赫明雷;彭玮;赵福广;刘思国

作者机构：

关键词： 禽分枝杆菌副结核亚种;22KD基因;ag85B基因;重叠延伸剪接技术;重组表达

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2009 年 17 卷 02 期

页码： 59-62

摘要： 为表达并纯化禽分枝杆菌副结核亚种主要抗原基因的串联重组蛋白r22-ag85B,期望研制出一种新型副结核病疫苗,以禽分枝杆菌副结核亚种参考株P18的基因组DNA为模板,扩增了22KD基因和ag85B基因。采用重叠延伸剪接PCR技术(SOE-PCR)获得了融合基因22-ag85B,将基因连接于表达载体pET32a(+),构建了重组质粒pET22-ag85B。将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG(终浓度1mmol/L)诱导后对表达产物进行Western blot检测。检测结果显示,成功表达并纯化了重组蛋白r22-ag85B,其分子质量约为65ku。Western blot检测表明此蛋白具有良好的免疫学活性。禽分枝杆菌副结核亚种22-ag85B重组蛋白的成功表达及纯化为副结核病疫苗的研究工作奠定了基础。

分类号： S852.618

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