鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的融合表达及兔抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙芬芬

作者： 孙芬芬;宇文延青;高宏雷;高玉龙;祁小乐;高立;王笑梅

作者机构：

关键词： 鸡传染性法氏囊病病毒;VP2;融合表达;兔抗血清

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2009 年 17 卷 04 期

页码： 11-14

摘要： 以鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)Gt株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP2基因,经EcoR I/SalI酶双酶切处理后与经相同酶切处理的pET30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及序列鉴定正确的阳性重组子转化E.coliDE3菌,经IPTG诱导,表达的VP2蛋白通过Ni-NTA树脂纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗血清,并对其进行间接ELISA、IFA和Western blot分析。SDS-PAGE分析表明,在IPTG诱导下成功表达了约为50kDa的His-VP2融合蛋白;间接ELISA检测制备的兔抗血清效价在1:25 600以上;IFA及Western-blot分析结果表明,其可特异性结合真核表达的VP2蛋白以及IBDV全病毒。研究结果提示,兔抗VP2血清可用于VP2蛋白及病毒的检测,为进一步研究IBDV分子生物学功能提供了物质基础。

分类号： S852.5

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