乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王桂荣

作者： 王桂荣;严作廷;王东升;米宝明;崔燕

作者机构：

关键词： 乳牛;子宫内膜抗菌肽;BNBD5基因;克隆;原核表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2009 年 39 卷 06 期

页码： 538-542

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研发防治乳牛子宫内膜炎的抗菌肽生物制剂,根据已发表的牛抗菌肽基因序列设计了1对引物,用试剂盒提取乳牛新鲜子宫内膜总RNA,经RT-PCR扩增,将克隆的抗菌肽BNBD5基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pET30a中,经IPTG诱导原核表达,通过Western-blot检测融合蛋白BNBD5的表达水平。结果表明,RT-PCR扩增出的cDNA片段长138 bp,编码45个氨基酸的多肽,多肽中含6个保守半胱氨酸残基。用Blast程序进行检索比较显示,克隆出了牛防御素家族成员BNBD5基因,并成功构建了pET30a-BNBD5载体,经IPTG诱导,pET30a-BNBD5原核表达产物的相对分子质量约为10 ku,与预期的融合蛋白大小一致,证实构建的重组质粒能够在大肠杆菌中表达。

分类号： S859.797

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