一步法TaqMan~探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 路斌

作者： 路斌;袁秀芳;徐丽华;李军星;郭勇;王一成

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;实时荧光定量RT-PCR;一步法

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2012 年 24 卷 03 期

页码： 396-403

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应;可以检测到10个拷贝数的模板RNA或1个TCID50的PRRSV,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)<1%,具有较好的重复性。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对72份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出40份阳性,高于常规RT-PCR方法(28份阳性)。建立的荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于PRRSV的实验室快速诊断和流行病学调查。

分类号： S858.28

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