福氏志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体构建及其鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 魏小娟

作者： 魏小娟;张继瑜;王松泰;牛建荣;李剑勇;周旭正;吴培星;李金善

作者机构：

关键词： 志贺菌;marA;原核表达

期刊名称： 中国动物检疫

ISSN： 1005-944X

年卷期： 2008 年 25 卷 11 期

页码： 26-28

摘要： 目的构建志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体并对其表达的蛋白进行鉴定。方法采用PCR从志贺菌基因组DNA中扩增得到志贺菌外输调节蛋白基因marA,并将其定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建原核表达重组质粒pET-30a-marA,重组子经限制性内切酶分析、PCR及测序鉴定后,转化宿主菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果经鉴定证实原核表达载体pET-30a-marA构建成功,且在大肠杆菌BL21中获得了MarA与His的融合表达,且表达蛋白产物的分子质量大小与预期值一致,并可被特异性抗体所识别。结论MarA在大肠杆菌中获得了高效的表达,为进一步研究其免疫学特性和功能奠定了基础。

分类号： R346

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