多主棒孢SdhB-H278Y突变位点real-time PCR检测体系的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱广雪

作者： 朱广雪;阎昱韬;孙炳学;周荣佳;岳圆圆;谢学文;柴阿丽;李磊;李宝聚;石延霞

作者机构：

关键词： 黄瓜;多主棒孢;real-time PCR;抗药性;啶酰菌胺

期刊名称： 中国蔬菜

ISSN： 1000-6346

年卷期： 2023 年 001 期

页码： 60-67

收录情况： 北大核心

摘要： 根据GenBank已登录序列中黄瓜多主棒孢琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)基因序列差异,针对SdhB-H278Y突变设计特异性引物,建立SdhB-H278Y突变实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测体系.结果表明:供试多主棒孢携带SdhB-H278Y、SdhB-I280V突变;SdhB-H278Y突变株对啶酰菌胺抗性较强,EC50值为21.47μg·mL-1或>30μg·mL-1;建立的real-time PCR检测体系具有良好的线性关系,相关系数R2=0.9929,可特异性检测SdhB-H278Y突变,灵敏度为3.6×10-4 ng· μL-1,为AS-PCR的10倍.利用携带SdhB-H278Y突变不同比例的基因组DNA对检测体系进行验证,预期值与检测值具有很高的相关性,R2=0.9997;利用该检测体系对山东地区黄瓜棒孢叶斑病病斑中多主棒孢SdhB-H278Y突变株所占比例进行检测,检测结果为0.12%~2.69%.综上,本试验建立的real-time PCR检测体系高效、灵敏、定量,可用于多主棒孢SdhB-H278Y突变的检测,为黄瓜棒孢叶斑病抗性治理提供技术支持.

分类号： S436.421.1

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