文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘浩哲
作者： 刘浩哲;张志琪;于永翔;王春元;王印庚;荣小军;廖梅杰;罗璋;张正
作者机构：
关键词： 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种;flgK基因;致病性;分子机制
期刊名称： 微生物学报
ISSN： 0001-6209
年卷期： 2025 年 65 卷 008 期
页码： 3583-3599
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae,PDD)是一种广泛存在于海水中的致病菌,能够感染多种经济鱼类,对全球水产养殖业造成巨大经济损失.鞭毛基因flgK可编码鞭毛钩蛋白FlgK,该蛋白对细菌鞭毛的正常形成至关重要.[目的]系统解析flgK基因对PDD感染宿主毒力作用的影响机制.[方法]采用高效自杀质粒介导的同源重组方法构建PDD的flgK基因缺失突变株(ΔflgK-PDD),并通过基因测序证实突变成功.对ΔflgK-PDD在生物学特性、毒力基因表达及致病性等方面与野生株(WT-PDD)的差异进行比较分析.[结果]ΔflgK-PDD的生长能力、溶血活性、磷脂酶活性与WT-PDD无显著差异.然而,ΔflgK-PDD的运动能力和生物被膜形成能力较WT-PDD显著下降.透射电子显微镜观察显示,ΔflgK-PDD未能形成鞭毛结构.通过人工感染实验发现ΔflgK-PDD对许氏平鲉的LD50 为WT-PDD的 557%,致病性显著降低.实时荧光定量PCR结果进一步表明,与WT-PDD株相比,ΔflgK-PDD的鞭毛相关基因fliK和flgL,II型分泌系统(type II secretion system,T2SS)相关基因gspC和gspD以及毒力基因hlyApl表达显著下调;而鞭毛相关基因fliH,T2SS相关基因gspE,外膜相关基因ompP、flhB和脂多糖相关基因lapB表达显著上调,其余基因未见显著变化.[结论]flgK基因的突变可导致ΔflgK-PDD无法形成完整的鞭毛结构,并显著改变鞭毛相关基因的相对表达水平,从而降低其运动性和定殖能力,最终导致其致病性显著下降.
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