欧洲类禽H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 汪琪

作者： 汪琪;杨海明;汪秀会;刘晓敏;王帅勇;姚云;朱世强;单同领;童武;周艳君;李国新;郑浩;高飞;姜一峰;童光志;于海

作者机构：

关键词： 猪流感病毒;病毒拯救;生长曲线;H1N1亚型

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2018 年 03 期

页码： 23-27

收录情况： 北大核心

摘要： 为了构建猪流感病毒A/swine/Tian Jin/6/2013(H1N1)的反向遗传操作技术平台,通过RT-PCR技术分别扩增了欧洲类禽H1N1亚型猪流感病毒的8个基因片段,并分别连接至双向转录表达载体p BD上。纯化8个重组质粒,共转染到293T细胞。54 h后收集上清,并接种到MDCK细胞。待细胞病变明显时,进行血凝试验检测收集到的上清,测得血凝效价为1∶32。测定拯救病毒的全基因组序列,结果显示,在核苷酸序列上,拯救病毒与野生病毒完全一致。细胞病变情况显示,拯救毒株与野生毒株无明显差别。本研究成功拯救了欧洲类禽H1 N1亚型猪流感病毒,为猪流感病毒的致病机理、基因功能研究以及H1N1亚型猪流感病毒新型疫苗的研发奠定了基础。

分类号： S852.65

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