鸡β-肌动蛋白第一内含子对EIAV载体质粒外源蛋白表达能力的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩凌霞

作者： 韩凌霞;李亚明;尹岚岚;司昌德;于海波;曲连东

作者机构：

关键词： 马传染性贫血病毒;基因转移载体;鸡β-肌动蛋白第一内含子;增强绿色荧光蛋白

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2007 年 27 卷 11 期

页码： 77-81

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)基因转移载体pcPPTW PRE为基础,用含不同长度片段的鸡β-肌动蛋白启动子替换原有的人巨细胞病毒立即早期启动子(CMVIEp)启动外源基因的表达,分别构建了2个基因转移载体,含部分第一内含子的pWCAGP0.8和含全长内含子的pWCAGP1.6。连同已构建的不含内含子的质粒pcPPTWCAG,采用磷酸钙法分别转染HEK293细胞和DF-1细胞,利用荧光显微镜观察报告基因eGFP蛋白的表达。并利用流式细胞仪定量。统计学分析结果表明,在HEK293细胞中,pcPPTWCAG、pWCAGP0.8和pWCAGP1.6表达阳性率分别为47.9%、46.1%和23.8%,转染后48h,收获细胞,利用流式细胞仪比较转染细胞中EGFP表达阳性细胞的百分率。结果表明,在HEK293细胞中,pcPPTWCAG、pWCAGP0.8和pWCAGP1.6的阳性细胞分别占计数细胞的47.9%、46.1%和23.8%;在DF-1细胞中,依次分别为12.4%、9.5%和4.2%,pcPPTWCAG与pWCAGP1.6差异显著。表明不含内含子的EIAV载体质粒表达EGFP的能力高于含部分和全长内含子的载体。

分类号： Q78

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