苏云金芽孢杆菌cry基因芯片检测方法的研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘旭光

作者: 宋福平;文思远;王升启;黄大昉;张杰

作者机构:

关键词: 寡核苷酸芯片;苏云金芽孢杆菌;cry基因;高浓度Klenow片段酶标记法;杂交

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2004 年 37 卷 07 期

页码: 987-992

收录情况: 北大核心

摘要: 建立了一种不经PCR扩增而直接应用寡核苷酸芯片从苏云金芽孢杆菌总DNA中检测cry基因的方法。对探针长度、浓度、总DNA含量、标记方法以及灵敏度等条件进行了研究。结果表明,用高浓度Klenow酶随机标记高浓度的总DNA与寡核苷酸探针(40~50mer、40μmol·L-1)杂交可用于检测Bt菌株中含有的cry基因;不同长度探针之间对杂交信号的影响存在显著性差异(P<0.01),而不同浓度的探针之间没有显著性差异。此方法的其它条件为杂交温度42℃、时间3h;检测的样品总DNA的灵敏度约为2.5μg;标记产物杂交用量(0.625~20μg)的对数值与信号值的对数值之间存在明显的线性关系(r2=0.985~0.989)。

分类号: S476

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