胱硫醚-β-合成酶的高效表达及酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陈武

作者: 陈武;刘春华;何鹏辉;蔡冬波;陈守文;王冬

作者机构:

关键词: 胱硫醚-β-合成酶(CBS);高效表达;酶学性质;诱导表达

期刊名称: 湖北农业科学

ISSN: 0439-8114

年卷期: 2024 年 63 卷 011 期

页码: 203-207

收录情况: 北大核心

摘要: 以酿酒酵母的cbs基因序列为模板,依据大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,以pET28a(+)为骨架构建表达质粒pET28a-cbs,并利用Escherichia coli BL21(DE3)进行胱硫醚-β-合成酶(CBS)的表达,同时优化诱导表达条件并分析CBS的酶学性质。结果表明,在诱导温度为16℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L、诱导时间为18 h时,CBS浓度最高,为266.67 mg/L。CBS发挥催化作用过程中也受到多种环境因素的影响,在40~55℃时,CBS相对酶活性迅速下降,CBS不适宜长期保存于温度大于40℃的环境中;CBS适宜长期保存于pH为6.5~8.5的缓冲溶液中,不宜保存在过酸或过碱的缓冲溶液中;CBS在温度40℃、pH 8.0条件下,酶活性较高。

分类号: Q78%Q55

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