NPM1 K263 SUMO化位点在PEDV N蛋白与NPM1共定位中的作用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 季朝阳

作者： 季朝阳;石达;陈建飞;王潇博;时洪艳;张鑫;冯力

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;核衣壳蛋白;核仁蛋白NPM1;定点突变

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2017 年 11 期

页码： 940-942

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为阐明细胞核仁蛋白NPM1与猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N蛋白)共定位的关键位点。本实验通过设计突变引物,利用重叠延伸PCR方法对NPM1氨基酸位点T199、K230和K263进行定点突变,分别将其克隆至真核表达载体pDsRed2-N1中,获得重组质粒pDsRed2-NPM1(T199A)、pDsRed2-NPM1(K230R)、pDsRed2-NPM1(K263R)。随后分别将pDsRed2-NPM1(WT)、pDsRed2-NPM1(T199A)、pDsRed2-NPM1(K230R)、pDsRed2-NPM1(K263R)与重组质粒pAcGFP-N共转染VeroE6细胞。共聚焦结果显示NPM1(T199A)、NPM1(K230R)、野生型NPM1均与N蛋白共定位于细胞的核仁中。虽然NPM1(K263R)与N蛋白具有共定位现象,但两者共定位于细胞核中。该实验结果为进一步研究核仁蛋白NPM1参与PEDV复制的分子机制奠定了基础。

分类号： S852.651

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