盖塔病毒TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 顾志刚
作者: 顾志刚;郭洁真;王子涵;孙彤;陈鸿军;孙竹筠;陈丹清
作者机构:
关键词: 盖塔病毒;nsP1;TaqMan探针;实时荧光定量RT-PCR
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2025 年 33 卷 001 期
页码: 112-118
摘要: 盖塔病毒(GETV)是一种在我国广泛分布的虫媒病毒,可通过蚊虫传播感染人畜,导致猪、马等动物出现发热、出疹及淋巴结肿大等症状,可致妊娠母猪流产或死胎。目前尚无特效治疗方式。本研究根据GenBank公布的盖塔病毒nsP1基因序列,设计3组引物探针,筛选出最佳的引物探针,建立一种灵敏度高、特异性强的针对盖塔病毒的TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法。对该方法进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品检测。标准曲线Ct值与相应质粒标准品浓度存在良好的线性关系,相关系数(R2)为0.9989;对含GETV基因的重组质粒pCDNA3.1-nsP1体外转录RNA进行敏感性试验,最低检出限达10 copies,是普通 RT-PCR 方法的1000倍,敏感性高;与PRRSV、CSFV与PEDV的核酸不发生交叉反应,特异性好;变异系数小于2%,重复性好。本研究建立了一种敏感、特异的GETV检测方法,对GETV的快速诊断具有重要意义。
分类号: R373
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