幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姜云水

作者： 姜云水;方平楚;付亚萍;朱诚

作者机构：

关键词： 生物工程;幽门螺杆菌;cagA基因;CTB基因;水稻Wx启动子;基因融合;植物表达载体

期刊名称： 科技通报

ISSN： 1001-7119

年卷期： 2004 年 20 卷 03 期

页码： 189-193

收录情况： CSCD

摘要： 目的　构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法　采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3′端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBI A1300的表达框架内.结果　PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBI A1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论　成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础.

分类号： Q785

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