柔嫩艾美耳球虫保守蛋白CHP559基因克隆与真核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 翟颀

作者： 翟颀;黄兵;董辉;赵其平;朱顺海;梁思婷;李莎;杨斯涵;韩红玉

作者机构：

关键词： 柔嫩艾美耳球虫;CHP559基因;DF-1细胞;真核表达

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2015 年 31 卷 07 期

页码： 161-168

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建柔嫩艾美耳球虫保守蛋白Et CHP559基因的真核表达重组质粒pc DNA3.1-flag-Et CHP559,并转染DF-1细胞进行表达。利用5'RACE技术克隆获得了柔嫩艾美耳球虫Et CHP559基因全长c DNA序列,该基因全长为1 746 bp,ORF为104-1 327 bp,编码407个氨基酸,编码蛋白的分子量约为46 k D,并利用生物信息学分析该基因编码蛋白的性质、结构等特征,发现该蛋白含有跨膜结构和信号肽。通过RT-PCR扩增得到含完整开放阅读框的基因片段,并将其与真核表达载体pc DNA3.1-flag连接,构建了真核重组表达质粒pc DNA3.1-flag-Et CHP559,所构建的真核重组表达质粒pc DNA3.1-flag-Et CHP559经过PCR和双酶切鉴定,可见一条大小约为1 224 bp的目的条带;重组质粒转染DF-1细胞后,免疫印迹检测可见大小约为47 k D的目的蛋白条带,间接免疫荧光实验显示在DF-1细胞中检测到绿色荧光。这些研究结果表明已成功获得了Et CHP559的全长序列,并成功构建了Et CHP559的真核重组表达质粒,在真核细胞DF-1中获得表达,为深入研究Et CHP559的功能奠定了基础。

分类号： S852.7

  • 相关文献

[1]柔嫩艾美耳球虫胱硫醚β合成酶基因克隆及在真核细胞中的表达. 李聪,董辉,朱顺海,朱雪龙,王自文,赵其平,夏伟丽,门启斐,黄兵. 2016

[2]柔嫩艾美耳球虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶真核表达质粒的构建及其在DF-1细胞中的表达. 朱雪龙,黄兵,韩红玉,赵其平,朱顺海. 2016

[3]柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2真核表达质粒的构建及在细胞中的表达. 杨斯涵,赵其平,韩红玉,朱顺海,李莎,翟颀,梁思婷,杨亮宇,黄兵. 2015

[4]柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2真核表达质粒的构建及其免疫保护性评价. 杨斯涵,韩红玉,赵其平,朱顺海,黄兵,翟颀,李莎,梁思婷,董辉,杨亮宇. 2015

[5]柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达. 王晔,韩红玉,董辉,赵其平,朱顺海,姜连连,薛璞,舒凡帆,黄兵. 2015

[6]柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达. 王晔,韩红玉,董辉,赵其平,朱顺海,姜连连,薛璞,舒凡帆,黄兵. 2015

[7]柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3在293T细胞中的表达研究. 王晔,韩红玉,董辉,姜连连,赵其平,朱顺海,薛璞,舒凡帆,黄兵. 2013

[8]柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶真核表达质粒的构建与鉴定. 王艳歌,董辉,韩红玉,赵其平,朱顺海,李榴佳,吴有陵,黄兵. 2014

[9]柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2基因真核表达载体的构建及在293T细胞中表达. 王晔,姜连连,韩红玉,薛璞,赵其平,董辉,朱顺海,舒凡帆,黄兵. 2012

[10]柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析. 孔春林,韩红玉,姜连连,王晔,董辉,赵其平,朱顺海,李婷,薛璞,舒凡帆,黄兵. 2012

[11]柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3基因在毕赤酵母中的表达及分析. 孔春林,韩红玉,李洋,董辉,姜连连,李婷,赵其平,朱顺海,黄兵. 2012

[12]柔嫩艾美耳球虫AMA1基因DNA疫苗的免疫保护效果. 王晔,赵其平,朱顺海,董辉,姜连连,薛璞,舒凡帆,黄兵,韩红玉. 2019

[13]鸡球虫病7价多表位嵌合重组抗原ET seven真核质粒的构建、表达及其初步功能分析. 倪君丽,刘欣超,孙栋,方肆云,王定爱,申翰钦,严专强,戚南山,孙铭飞,顾有方. 2024

[14]DF-DF-1细胞的保存期试验及致瘤性鉴定. 毕志香,李鹏成,揭鸿英,朱亚露,何家惠,陈瑾,褚轩,于漾,侯继波. 2015

[15]DF-1细胞染色体制备及核型分析. 于漾,毕志香,揭鸿英,朱亚露,褚轩,郑其升,何家惠,侯继波. 2014

[16]IBDV超强毒株NJ09株在DF-1细胞上的增殖工艺. 揭鸿英,朱亚露,毕志香,赵阳,何家惠,于漾,侯继波. 2017

[17]鸡传染性法氏囊病病毒BJQBJQ902株在悬浮培养DF-DF-1细胞上的增殖特性研究. 沈佳,姜北宇,章振华,李林,史爱华,黄凤军,张建伟. 2016

[18]DF-1细胞中TLR7编码基因的敲除及其抗FAdV-4感染的天然免疫应答. 恽君雯,陈丽,徐悦,鲍熹,冯磊,高崧. 2023

[19]鸡传染性法氏囊病病毒BJQ902株在悬浮培养DF-1细胞上的增殖特性研究. 沈佳,姜北宇,章振华,李林,史爱华,黄凤军,张建伟. 2016

[20]DF-1细胞替代CEF细胞测定IBDV液抗原含量和血清中和抗体效价的研究. 李林,沈佳,史爱华,赵蕾,习硕,姜北宇,张建伟,章振华. 2021

作者其他论文 更多>>

微信小程序