水貂IGF-Ⅰ基因的克隆、序列分析及原核表达研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 荣敏

作者： 荣敏;杨福合;许尚忠;王桂武;邢秀梅;吴琼

作者机构：

关键词： 水貂;胰岛素样生长因子-Ⅰ;克隆;原核表达

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2009 年 29 卷 08 期

页码： 38-44

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 获得水貂IGFⅠ-基因的cDNA序列,实现IGFⅠ-基因在大肠杆菌中的融合表达。利用RT-PCR技术从水貂肝脏组织扩增出水貂胰岛素样生长因子Ⅰ(IGFⅠ-)的编码区序列。此序列编码153个氨基酸的前体蛋白质。同源性分析表明IGF-Ⅰ的核苷酸和氨基酸序列与已报道的金丝猴、小熊猫、大熊猫、东北虎、马等哺乳动物的序列高度同源(>90%)。对位比较发现水貂的信号肽序列具有氨基酸特异性,这些氨基酸是否影响水貂IGFⅠ-分子的构型、进而影响功能则需要进一步的研究。将构建的重组表达载体pGEX-6P-1-IGF-Ⅰ转入大肠杆菌BL21进行原核表达,得到高效融合表达,融合蛋白分子量约为34kDa。Western-blotting杂交证实了表达蛋白的抗原活性。成功克隆、表达了水貂IGFⅠ-基因,分析和预测了其结构和功能,为进一步的生物活性研究打下基础。

分类号： Q78

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