宏基因组中新角蛋白酶基因KerA的克隆与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马建

作者： 马建;许诺;王英哲;王云鹏;刘艳芝

作者机构：

关键词： 宏基因组;皮革鞣制;角蛋白酶;KerA基因;基因工程重组

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2017 年 05 期

页码： 37-40

收录情况： 北大核心

摘要： 皮革鞣制过程中产生大量有害物质,对环境造成了严重污染。角蛋白酶是一类水解角蛋白的酶,是皮革鞣制中理想的鞣制剂替代品。为了发掘角蛋白酶重要的基因资源,试验从土壤中克隆KerA基因,构建了原核表达载体p ET-22b-KerA,通过热激法转入BL21(DE3)中进行表达并在表达时间上进行了优化,对表达的产物进行Western-blot鉴定,通过Ni2+Sepharose Fast Flow分离纯化了KerA,并通过水解角蛋白验证其活性。结果表明:克隆的KerA基因可以在原核中表达,并具有水解角蛋白的活性。说明基因工程重组手段生产KerA具有可行性。

分类号： Q78`Q55

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