H5N1禽流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张坤

作者: 张坤;黄伟;李刚

作者机构:

关键词: H5N1禽流感病毒;环介导等温扩增;条件优化

期刊名称: 生物技术通讯

ISSN: 1009-0002

年卷期: 2009 年 02 期

页码: 217-220

摘要: 目的:建立H5N1禽流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法:从GenBank中获得H5N1禽流感病毒血凝素(HA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorerV3软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物、内引物和环引物,同时以所克隆的阳性质粒为模板,对试验中的几个重要参数进行优化。结果:LAMP检测方法对H5N1禽流感病毒的灵敏度达到4~6个拷贝,其引物对于H1、H9亚型禽流感病毒和新城疫病毒无非特异性扩增,表现出良好的H5亚型特异性。结论:建立的H5N1禽流感病毒环介导等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为快速检测禽流感病毒提供了新方法和新思路。

分类号: S854.43

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