nptⅡ基因真菌表达载体的构建及在苹果炭疽叶枯病菌遗传转化中的应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴建圆

作者： 吴建圆;冀志蕊;李壮;程存刚;周宗山;张俊祥

作者机构：

关键词： 炭疽病;新霉素磷酸转移酶基因;农杆菌;启动子

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2015 年 34 卷 10 期

页码： 2156-2160

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在构建1个适用于苹果炭疽叶枯病菌(Glomerella cingulata)的遗传转化载体,为系统研究该病原菌基因的功能提供便利。通过基因工程及分子生物学技术,将三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因启动子Pgap和新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)连结于质粒p Cambia0380中。构建的载体p Gapneo R1导入根癌农杆菌LBA4404后,通过农杆菌介导的转化技术(ATMT),成功将nptⅡ基因盒整合到苹果炭疽叶枯病菌基因组中。Southern blot分析结果表明,随机挑取的转化子T-DNA均以单拷贝插入到苹果炭疽叶枯病菌基因组中,表明该载体适合于苹果炭疽叶枯病菌的遗传转化。此外,该载体也可用于构建苹果炭疽叶枯病菌的目标基因的回补载体、超表达载体和荧光融合蛋白表达载体。

分类号： S436.611.12

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