美洲商陆抗病毒蛋白真核表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈定虎

作者： 王锡锋;李莉;周广和

作者机构：

关键词： 美州商陆抗病毒蛋白;毕赤酵母;发酵;表达;活性测定

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2003 年 11 卷 02 期

页码： 183-186

收录情况： 北大核心

摘要： 从美洲商陆(Phytolaccaamericana)叶片中通过异硫氰酸胍法提取出了总RNA,经RT-PCR扩增出缺失突变型抗病毒蛋白PAP基因,将该基因克隆于分泌型真核表达载体pPIC9K,然后导入毕赤酵母(Pachiapastoris )菌株GS115细胞。在甲醇的诱导下,经过酵母高密度发酵进行PAP的表达,经SDS-PAGE分析。结果表明,在培养基上清液中含有一明显的特异性蛋白条带,大小为34kD,经Western-blotting分析,该蛋白与法国PAP抗血清有特异性反应,体外活性检测表明该蛋白对病毒的侵染性具有高度的抑制性,表明该基因在毕赤酵母GS115中得到了表达。

分类号： Q78

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