日本血吸虫SjRAD23基因的克隆表达及基因重组抗原的免疫保护效果

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李长健

作者： 李长健;张旻;洪炀;韩艳辉;曹晓丹;韩宏晓;傅志强;朱传刚;陆珂;李浩;林矫矫

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;辐射敏感蛋白23;表达;免疫保护;疫苗候选分子

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2014 年 30 卷 11 期

页码： 1669-1678

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 辐射敏感蛋白23具有核苷酸切除修复功能,在泛素蛋白酶体途径中起到重要作用。本研究利用PCR技术克隆了日本血吸虫辐射敏感蛋白23(Sj RAD23)编码的c DNA序列,成功获得Sj RAD23的基因序列,其ORF为1 053 bp。构建Sj RAD23基因重组表达质粒p ET28a(+)-Sj RAD23,并在大肠杆菌BL21中成功诱导表达,重组蛋白在上清和沉淀中都有存在。利用免疫组化技术检测该蛋白在虫体的分布情况,该蛋白广泛分布在日本血吸虫虫体被膜。用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫小鼠血清中检测到较高水平的特异性Ig G、Ig G1和Ig G2a。Western blotting分析显示重组蛋白能够被日本血吸虫成虫可溶性抗原免疫小鼠血清所识别。用重组蛋白r Sj RAD23免疫结果与206佐剂对照组比较,r Sj RAD23在BALB/c小鼠中诱导了35.94%减虫率,40.59%肝脏减卵率。结果表明Sj RAD23具有作为疫苗候选分子的潜力。

分类号： R392

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