农杆菌介导甜高梁转Btcry1Ah的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱莉

作者： 朱莉;郎志宏;李桂英;何康来;岳同卿;张杰;黄大昉

作者机构：

关键词： 甜高粱;cry1Ah;农杆菌转化;抗虫性

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2011 年 44 卷 10 期

页码： 1989-1996

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】建立一套高效、稳定的甜高梁农杆菌遗传转化体系，并在甜高粱中验证来源于苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因cry1Ah表达产物的杀虫活性。【方法】以甜高粱幼穗愈伤组织为转化受体，通过农杆菌介导法将密码子优化过的Bt cry1Ah导入2个甜高粱品种“BABUSH’和“MN-3025”中。对获得的再生植株进行PCR检测、RT-PCR分析及除草剂抗性、目的蛋白表达水平和抗虫性鉴定分析。【结果】对336块幼穗愈伤组织块进行了农杆菌侵染，经双丙氨膦(Bialaphos)梯度筛选后共获得66株再生植株，PCR鉴定在8个转化事件中有22株为阳性植株，平均转化率为2．38％。RT-PCR检测结果表明，cry1Ah在T_0甜高梁转基因植株中能够正常转录。Western blotting分析和ELIsA定量测定显示，有5株可检测到Bt蛋白，但Bt蛋白含量差异较大，最高可达165．69ng·g~(-1)叶片鲜重(FW)，最低的仅为1．93 ng·g~(-1)叶片鲜重(FW)，平均为87．5 o ng-g~(-1)Fw。饲虫试验表明，有2株转基因甜高粱植株对亚洲玉米螟(Ostrinis furnacalis)表现为抗性。【结论】利用建立的以甜高梁幼穗为外植体的农杆菌遗传转化体系，可获得具有玉米螟抗性的转基因甜高粱植株，其后代遗传稳定性还有待于进一步的研究。

分类号：

  • 相关文献

[1]农杆菌介导甜高粱转Btcry1Ah的研究. 郎志宏,李桂英,何康来,岳同卿,张杰,黄大昉. 2011

[2]农杆菌介导甜高粱转Bt cry1Ah的研究. 郎志宏,李桂英,何康来,岳同卿,张杰,黄大昉. 2011

[3]农杆菌介导甜高梁转Bt cry1Ah的研究. 郎志宏,李桂英,何康来,岳同卿,张杰,黄大昉. 2011

[4]抗虫/耐草甘膦双价融合基因表达载体的构建及烟草转化. 祁伟彦,孙鹤,周妮,朱莉,郎志宏,黄大昉. 2011

[5]Cry1Ab/Cry1Ah杂合蛋白构建与功能研究. 蒋健,束长龙,张杰,宋福平. 2015

[6]转Bt基因抗虫玉米HGK60的农艺性状分析. 梁海生,李梦桃,李圣彦,汪海,张杰,郎志宏. 2018

[7]转大豆铁结合蛋白基因水稻的初步研究. 王彩芬,付永彩,安永平,韩国敏,张文银,马静. 2008

[8]农杆菌介导的抗除草剂基因转入两系杂交稻恢复系的研究. 胡国成,肖晗,于永红,朱正歌,斯华敏,付亚萍,孙宗修. 2000

[9]构建香菇转化的同源筛选标记的研究. 李菲,章炉军,姜宁,刘建雨,于海龙,尚晓冬,宋春艳,谭琦. 2019

[10]将GNA基因导入宁夏枸杞(Lycium bararum L．)及其表达的研究. 曲玲,曹有龙,侯玉霞,吴家和,罗青,田颖川. 2007

[11]锌指蛋白基因ZA T12提高转基因高油酸花生抗寒性. 王旭达,张高华,王鹤,于树涛,李怀梅,王晓燕,范琦. 2020

[12]影响农杆菌介导旱稻转化效率主要因素的研究. 石云鹭,丁在松,张彬,张桂芳,赵明. 2007

[13]小麦大龄幼胚再生性能改进与农杆菌转化. 石珍源,殷桂香,杜丽璞,陶莉丽,徐惠君,叶兴国. 2011

[14]共培养的水分状态对农杆菌转化玉米的影响. 吕孟雨,董福双,张俊敏,王海波. 2018

[15]共培养的水分状态对农杆菌转化玉米的影响. 吕孟雨,董福双,张俊敏,王海波. 2018

[16]应用农杆菌介导法获得转大麦黄矮病毒GPV株系复制酶基因ORF1的小麦植株. 吴茂森,刘太国,成卓敏. 2008

[17]提高植物农杆菌转化效率辅助策略研究进展. 叶兴国,王新敏,王轲,杜丽璞,林志珊,徐惠君. 2012

[18]农杆菌介导木薯遗传转化过程中的几个影响因素. 王颖,郭军辉,陈雄庭,王文泉,吴坤鑫,王海燕. 2013

[19]小麦TaVIP1家族基因克隆、分子特性及功能分析. 赵佩,腾丽杰,王轲,杜丽璞,任贤,佘茂云,叶兴国. 2016

[20]农杆菌介导的双孢蘑菇菌丝转化技术探讨. 蔡志欣,陈美元,廖剑华,李洪荣,郭仲杰,蔡丹凤,王泽生. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序