鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF4基因的克隆、表达与免疫学检测方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周勇

作者： 周勇;范玉顶;徐进;马杰;江南;刘文枝;曾令兵

作者机构：

关键词： 鲤疱疹病毒Ⅱ型;ORF 4;原核表达;多克隆抗体;免疫荧光检测

期刊名称： 淡水渔业

ISSN： 1000-6907

年卷期： 2017 年 47 卷 01 期

页码： 61-65

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鲤疱疹病毒II型(Cyprinid herpesvirus Ⅱ,Cy HV-2)ORF 4基因序列(Gen Bank:JQ815364.1)设计特异性引物,PCR扩增得到ORF 4基因编码框全长序列1 041 bp,将其克隆至原核表达载体p ET-32a(+)中,构建了重组原核表达载体p ET-32a-ORF 4。将p ET-32a-ORF 4重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到融合表达的重组蛋白,融合表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,其分子质量约为57 ku,与预期大小一致。将纯化的重组蛋白免疫日本大耳兔,制备了多克隆抗体,ELISA检测抗体效价大于1∶50 000,Western blot检测显示该抗体可以特异性识别重组蛋白。间接免疫荧光检测结果表明:该多克隆抗体可与由Cy HV-2感染引起细胞病变的异育银鲫脑组织细胞(GICB)发生特异性的结合。

分类号： S943

  • 相关文献

[1]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗体制备与免疫原性分析. 周勇,史玉恒,范玉顶,刘文枝,江南,赵建青,许晨,曾令兵. 2018

[2]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗体制备与免疫原性分析. 周勇,史玉恒,范玉顶,刘文枝,江南,赵建青,许晨,曾令兵. 2018

[3]鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备. 彭俊杰,张琪,贾路路,林蠡,袁军法,曾令兵,周勇,刘学芹. 2017

[4]Carboxin抗性基因(Cbx~R)原核表达及多克隆抗体的制备. 李小宇,张正坤,王秋华,张春雨,张淋淋. 2015

[5]猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备. 薛刚,祝长青,郑其升,张雪花,李倬,侯继波. 2011

[6]延边白鹅IFN-α基因的原核表达及其表达产物生物学活性的研究. 彭永刚,陈海迪,高旭,张颖,鲁承. 2014

[7]绵羊肌肉抑制素C-端的表达、纯化及多克隆抗体的制备. 马毅,舒建洪,李晴,关宏,安晓荣,陈永福. 2009

[8]新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备. 毕庄莉,朱英奇,陈宗艳,李传峰,孟春春,王桂军,刘光清. 2014

[9]Asial型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 张中旺,张永光,王永录,潘丽,张昱. 2009

[10]小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备. 李琳,徐兆师,刘丽,于卓,李连城,陈明,马有志. 2009

[11]鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备. 陈明,徐幸莲,周光宏,汤晓艳,袁飞,陈爱亮. 2013

[12]桑树几丁质酶基因Machi1的克隆及原核表达. 肖圣燕,朱峰,冉瑞法,李镇刚,张永红,邵榆岚,唐芬芬,白兴荣. 2019

[13]西藏株小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 于瑞嵩,高位相,李凤平,董世娟,李震. 2018

[14]利用hAPOA1原核蛋白生产兔多克隆抗体. 徐志伟,赵杰,刘伟忠,刘照亭,王期. 2016

[15]猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备. 张艳,王文秀,刘海隆,曹宗喜,谭树义. 2019

[16]一个植物半胱氨酸蛋白酶多克隆抗体的制备及其应用. 彭琪琪,羊健,廖乾生,张恒木. 2018

[17]灰飞虱内生病毒HiPV外壳蛋白VP1多克隆抗体的制备及在病毒检测中的应用. 朴君,许春玲,朴敬爱,周益军,李硕. 2019

[18]猪源Viperin基因的克隆、原核表达以及抗体的制备. 方剑玉,朱文豪,李海利,郭小参,白献晓,王克领. 2018

[19]琥珀蚕丝腺转录因子基因AaSGF-1的克隆、原核表达及组织表达分析. 李琼艳,陈安利,荀利杰,刘增虎,廖鹏飞,杨伟克,董占鹏. 2021

[20]口蹄疫病毒3B蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备. 辛旭,吴香菊,齐静,王永志,李相安,杜正国,单虎,杜以军. 2021

作者其他论文 更多>>

微信小程序