番茄红素环化酶基因片段克隆及反义表达载体构建
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李莉
作者: 李莉;侯丽霞;施木田;吕鑫;何启伟
作者机构:
关键词: 番茄红素;β环化酶基因;ε环化酶基因;克隆;反义表达载体
期刊名称: 山东农业科学
ISSN: 1001-4942
年卷期: 2009 年 01 期
页码: 1-3+7
摘要: 根据已知的番茄红素环化酶基因,即β环化酶基因和ε环化酶基因的保守序列设计特异性引物。提取番茄叶片的RNA,经RT-PCR反应,扩增出723 bp和569 bp的目的片段,将它们分别连接到pEASY-T1 Cloning Vector上,测序鉴定其正确性。克隆到载体上的β环化酶基因用BamHⅠ和SmaⅠ双酶切,将基因反向插入PROK2表达载体上,构建PROK2-LYCb反义表达载体。同样连接到克隆载体上的ε环化酶基因用BamHⅠ和XbaⅠ双酶切,将基因反向插入PROK2表达载体上,构建PROK2-LYCe反义表达载体。
分类号: Q943.2
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