结核分枝杆菌pdhA基因的原核表达及其免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王华南

作者： 王华南;亓英芳;朱婷;于申业;刘慧芳

作者机构：

关键词： 结核分枝杆菌;pdhA基因;原核表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2011 年 07 期

页码： 697-700

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 100bp的pdhA(pyruvate dehydrogenase E1component alpha subunit)基因,经限制性酶切后,与pET-28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中,重组菌经1mmol/L IPTG诱导表达了pdhA蛋白,并用Ni-His-resin纯化了目的蛋白,经Western-blot分析鉴定了目的蛋白的免疫原性。结果显示,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在44ku处获得一目的条带,且具有很好的免疫原性。本研究成功获得了高纯度的重组蛋白pdhA,为深入研究其功能奠定了基础。

分类号： S852.61

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