草酸青霉菌11的cDNA文库构建及其溶磷相关基因的筛选
文献类型: 中文期刊
第一作者: 唐超西
作者: 唐超西;龚明波;李顺鹏;朱昌雄
作者机构:
关键词: 草酸青霉菌;eDNA文库;溶磷相关基因;有机酸;Penicillium oxalicum; cDNA library; phosphate-solubilizing related gene; organic acid
期刊名称: 中国农业科学
ISSN: 0578-1752
年卷期: 2012 年 45 卷 018 期
页码: 3792-3800
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】构建草酸青霉菌11的cDNA文库,筛选溶磷相关基因。【方法】利用SMART技术构建草酸青霉菌11的初级cDNA文库,通过难溶磷培养基筛选具有溶磷能力的转化子,测序并进行生物信息学分析。在难溶磷液体培养基中,进行转化子对溶液pH值、可溶磷含量的影响和产有机酸试验。【结果】成功构建了草酸青霉菌11的初级cDNA文库,其库容量约为5.29×10^6cfu·mL-1,重组率为99%;利用难溶磷固体培养基筛选,得到具有溶磷圈的转化子48个,其中转化子I一4的cDNA序列全长536bp,为一个新的序列,基因编码氨基酸残基序列长129n.t。转化子EcoliHST081-4在液体难溶磷培养基中培养,提高了有机酸的表达量,并增加了有机酸的种类,在培养i2h后,开始产生乙酸,24h后,溶液中产生乳酸、苹果酸和α-酮戊二酸,培养36h,溶液pH值由6.32降到3.69,可溶磷含量达到0.1076mg·mL-1。【结论】从草酸青霉II中筛选到一个溶磷相关基因pStI.
分类号: Q78
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