H5亚型禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 卢昆鹏

作者： 卢昆鹏;崔鹏飞;张芳;王晶;肖红波;邓国华;陈化兰

作者机构：

关键词： 禽流感病毒;单克隆抗体;血凝素

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2015 年 05 期

页码： 453-457

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备Clade 2.3.2分支H5亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体,以灭活的超速离心浓缩纯化的H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Guangdong/S1322/2010(DK/GD/S1322/2010)免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞,使其与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,通过血凝抑制(HI)和ELISA方法筛选,共获得2株能够稳定分泌HA蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株A4和D11。2株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链均为κ链。经HI检测,A4和D11的细胞培养上清和腹水的抗体效价分别为23、22和211、211。HI和中和试验结果显示,这2株单克隆抗体与Clade 2.3.2.B分支和Clade 2.3.2.C分支的病毒反应性良好,而与Clade 2.3.4和Clade 7分支的病毒均不反应。间接免疫荧光试验结果表明,这2株单克隆抗体能够识别MDCK细胞内感染的H5亚型禽流感病毒DK/GD/S1322/2010。结果表明,本研究制备的2株单克隆抗体为H5亚型禽流感病毒的检测和诊断奠定了物质基础。

分类号： S852.65

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