鉴别家兔多杀性巴氏杆菌与支气管败血波氏菌的双重TaqMan qPCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 程序

作者： 程序;仇汝龙;范志宇;胡波;陈萌萌;宋艳华;薛家宾;朱伟峰;钱莺娟;王芳

作者机构：

关键词： 多杀性巴氏杆菌;支气管败血波氏菌;双重TaqMan qPCR

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 671-677

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为提高家兔呼吸道疫病主要细菌性病原检测的可靠性和标准化,根据GenBank中多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida） Kmt基因与支气管败血波氏菌（Bordetella bronchiseptica） Fla基因分别设计特异性引物和探针,对反应条件进行优化,建立兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏菌双重TaqMan qPCR方法,并初步用于检测家兔肺脏及鼻拭子临床样本。结果显示,该方法建立的标准曲线在标准品浓度为2.35×106～2.35 copies/μL时有良好的线性关系;与绿脓杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌无交叉反应;最低检测限均为2.35 copies/μL;批内、批间重复性检验变异系数均小于2%。检测70份临床样本DNA结果显示,多杀性巴氏杆菌阳性率为50.0%,支气管败血波氏菌阳性率为42.9%,混合感染率为21.4%,该方法与细菌分离培养和常规PCR符合率分别为80.0%、 92.0%。以上数据表明,本研究建立的双重TaqMan qPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,无需病原菌的培养即可用于临床样品的快速检测,为兔多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏菌的实验室诊断及流行病学调查提供了快速、高效、准确的检测方法。

分类号： S852.61

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