文献类型： 中文期刊
第一作者： 韩玉莹
作者： 韩玉莹;谢利豹;李永锋;仇华吉
作者机构：
关键词： 猪瘟病毒;C株;Npro蛋白;增强型绿色荧光蛋白;生物学特性
期刊名称： 畜牧兽医学报
ISSN： 0366-6964
年卷期： 2020 年 51 卷 007 期
页码： 1699-1709
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 猪瘟兔化弱毒疫苗C株是我国自主研发的,用于预防猪瘟(CSF)的最好弱毒活疫苗.然而,现阶段的C株不具备标记功能,无法区分野毒感染与疫苗接种.本研究旨在将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)编码基因插入猪瘟病毒(CSFV)C株将其构建为报告病毒,为C株的基础研究提供病毒示踪工具,同时提供构建标记C株疫苗的方法.本研究中,笔者在CSFV C株中引入EGFP基因,分别构建了表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的报告CSFV rHCLV-EGFP,以及用CSFV强毒Shimen(SM)株Npro基因替换C株Npro基因后再引入EG FP基因的嵌合报告病毒rHCLV-Npro(SM)-EGFP.通过猪瘟抗原ELISA检测,直接观察荧光及Western blot检测EGFP的蛋白表达等方法对拯救的病毒进行鉴定,并在细胞和家兔上评价这两株病毒的生物学特性.结果显示,两株报告病毒的抗原ELISA结果均为阳性;在感染rHCLV-EGFP的细胞中并未观察到绿色荧光也未检测到EGFP蛋白,但在感染rHCLV-Npro(SM)-EGFP的细胞中观察到EGFP的绿色荧光并检测到EGFP蛋白;细胞试验结果表明,两株报告病毒与亲本病毒具有相似的生长特性且遗传稳定;家兔试验发现,rHCLV-Npro(SM)-EGFP保留了C株的在家兔体内的生物学特性,但rHCLV-EGFP失去了C株诱导家兔定型热反应的能力.构建的嵌合报告病毒rHCLV-Npro(SM)-EGFP可以作为C株的报告病毒进行应用:可以对病毒示踪,用于研究C株的复制过程、病毒与细胞的相互作用;同时,该嵌合报告病毒也具备发展为标记C株疫苗的潜力.
分类号： S852.651
- 相关文献
[1]应用酵母双杂交方法筛选与猪瘟病毒N~(pro)蛋白相互作用的宿主蛋白. 董泓,李素,贺番,廖亚金,何文瑞,孙元,罗玉子,胡永浩,仇华吉. 2014
[2]猪瘟病毒N~(pro)蛋白核仁穿梭及其对病毒复制的影响. 李永锋,申梁,黄俊华,李超,李素,孙元,仇华吉. 2013
[3]猪瘟病毒N~(pro)蛋白与宿主蛋白β-actin相互作用的鉴定. 冯烁,李素,王竞晗,董泓,何文瑞,仇华吉. 2014
[4]猪瘟病毒C株(脾淋毒)全长cDNA分子几个突变位点的重组改造. 张淼涛,冯霞,刘湘涛1,张彦明,田宏,胡建和,冶贵生,谢庆阁. 2005
[5]中国猪瘟兔化弱毒全基因组cDNA文库的构建和序列分析. 胡建和,刘湘涛,庄淑珍,田宏,张彦明,谢庆阁. 2002
[6]中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆. 胡建和,刘湘涛,张彦明,韩雪清,刘在新,张永国,谢庆阁. 2003
[7]猪瘟C-株和野毒株p80基因的序列分析. 庄淑珍,刘湘涛,韩雪清,张彦明,张永国,薛青红,赵卫东,谢庆阁. 2001
[8]猪瘟病毒生物学特性研究概述. 李学伍,张改平,郭启祥. 2007
[9]中国猪瘟兔化弱毒株（C-株）兔脾组织毒主要保护性抗原E2（gp55）基因序列分析. 韩雪清,李红卫,刘湘涛,李小兵,马军武,涂长春,胡弘博,殷震,蒋帅,刘伯华,赵启祖,李健强,李忠润,谢庆阁. 2001
[10]猪瘟病毒野毒株与疫苗株双重SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 王伟,符芳,陈欣,李雪松,李海忠,李曦. 2010
[11]猪瘟病毒C株兔脾毒在SK6细胞中的增殖培养及其鉴定. 张淼涛,冯霞,刘湘涛,张彦明,谢庆阁. 2004
[12]中国猪瘟兔化弱毒株(C-株)兔脾组织毒主要保护性抗原E2(gp55)基因序列分析. 韩雪清,李红卫,刘湘涛,李小兵,马军武,涂长春,胡弘博,殷震,蒋帅,刘伯华,赵启祖,李健强,李忠润,谢庆阁. 2001
[13]猪瘟病毒野毒株与疫苗株双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 王伟,符芳,陈欣,李雪松,李海忠,李曦. 2010
[14]几种基于pCAMBIA系列多用途新型植物表达载体的改建及优化. 李敬涛,孙新华,余刚,贾承国,杜茜,李启云,潘洪玉. 2014
[15]“睡美人”转座子系统介导EGFP转染鸡SSCs条件优化的研究. 李碧春,陈强,高波,田智泉,余飞,何先红,宋成义,常国斌,王克华. 2009
[16]鸡痘病毒复制非必需位点的筛选及鉴定. 张雪梅,赵妍,张晓彩,王云峰. 2015
[17]绿色荧光蛋白在α-1;3半乳糖基转移酶敲除猪组织器官的表达分析. 李智方,冯冲,纪慧丽,石宁宁,宋小凤,赵勤丽,龙川,潘登科,杨小淦. 2015
[18]脂质体介导法转染体细胞效率的优化. 侯颖,李文蓉,谭立新,牛志刚. 2005
[19]禽腺病毒QU株一个复制非必需区的鉴定. 孙锦,李秋艳,李云龙,黄兵,宋敏训,李新华. 2008
[20]表达绿色荧光蛋白的猪胚胎生殖细胞分离. 芮荣,邱妍,胡元亮,范必勤. 2004
作者其他论文 更多>>
-
抗原表位鉴定的新方法及其递送系统的研究进展
作者：高玉璇;翟焕杰;宋鑫;李树稳;仇华吉;李永锋
关键词：表位疫苗;B细胞表位;T细胞表位;递送系统
-
非洲猪瘟病毒消毒策略及活病毒鉴别检测技术研究进展
作者：樊高成;高晓薇;杨玉莹;罗玉子;仇华吉
关键词：非洲猪瘟病毒;活病毒鉴别;消毒
-
非洲猪瘟病毒毒力相关基因的鉴定及其功能研究进展
作者：蓝靖;陆战豪;罗瑞;宋鑫;孙元;杨玉莹;王涛;仇华吉
关键词：非洲猪瘟;非洲猪瘟病毒;毒力相关基因;减毒活疫苗;致病机制
-
生物安全在养猪业的发展与应用
作者：李树稳;李永锋;张交儿;孙元;张新;黄淑坚;仇华吉
关键词：生物安全;养猪业;疾病预防;发展;生物安全规范
-
伪狂犬病病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立
作者：向广韬;吴红霞;王异民;周末;王亚林;王翌;尹航;仇华吉;孙元
关键词：伪狂犬病毒;小鼠背根神经节;潜伏感染;再激活;模型
-
非洲猪瘟病毒的流行与遗传演化:变与不变
作者：陈盛媚;王涛;陆战豪;蓝靖;罗瑞;付强;孙元;仇华吉
关键词：非洲猪瘟;非洲猪瘟病毒;基因突变;重组;遗传演化;疫苗
-
用于传染病诊断的新型检测技术
作者：高晓薇;宋浩;仇华吉;罗玉子
关键词：新型检测技术;传染病;研究进展
