紫红线茄转基因体系优化及SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 包崇来

作者： 包崇来;杜黎明;胡天华;朱琴妹;胡海娇;毛伟海

作者机构：

关键词： 茄子;转基因;RNA干涉;农杆菌

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2014 年 41 卷 06 期

页码： 1105-1114

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立了以紫红线茄下胚轴为外植体的高效转基因体系。利用该方法,以获得茄子SmARF8基因RNA干涉转基因植株为目的,构建了以NPTⅡ基因为筛选标记的融合表达载体pCAMBIAI35S-2300-SmARF8-INT,并通过农杆菌介导,侵染茄子下胚轴外植体。含有2 mg·L-1吲哚乙酸,0.5 mg·L-1玉米素,25 mg·L-1卡那霉素和500 mg·L-1头孢氨苄的MS选择培养基可直接诱导外植体产生转基因分化苗,再生率达到80%。转基因苗继续生长并在不含激素的MS培养基上产生健壮根系,最终获得转基因株系。RT-PCR和qRT-PCR分析验证了T0代转基因株系中内源基因SmARF8被干涉后不表达或表达量降低,Southern blot分析显示选择的T0代转基因株系中存在1个T-DNA插入拷贝。以上研究结果表明利用建立的转基因体系SmARF8基因在茄子中被成功敲除。

分类号： S641.1

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