牛筋草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张杨

作者: 张朝贤;王金信;魏守辉;黄红娟

作者机构:

关键词: 牛筋草;ISSR-PCR;正交设计;单因子试验

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2012 年 38 卷 03 期

页码: 90-94

收录情况: 北大核心

摘要: 以牛筋草地上组织为材料,采用正交优化和单因子试验两种方法对影响牛筋草ISSR-PCR体系的Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度和DNA模板浓度5个因素进行优化试验,建立适合牛筋草ISSR-PCR的反应体系。结果表明,牛筋草ISSR-PCR反应体系的最佳条件为:Mg2+1.75mmol/L,dNTP 0.4mmol/L,Taq DNA聚合酶1U/25μL,引物0.3μmol/L,模板DNA 80ng/25μL,10×PCR Buffer 2.5μL/25μL。利用优化体系进行牛筋草的ISSR-PCR反应,可获得稳定性高、重复性好、背景清晰的电泳结果。

分类号: S451

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