口蹄疫病毒前导蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李娜

作者： 李娜;袁红;李平花;孙普;白兴文;龚婷;余琼;朱国强;李坤;马雪青;卢曾军;包慧芳;刘在新

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;前导蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2020 年 010 期

页码： 1215-1219

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 前导蛋白(Lpro)是口蹄疫病毒(FMDV)编码的重要毒力因子,在拮抗宿主抗病毒反应中发挥多种功能.为了获得抗Lpro的抗体以研究Lpro的功能,本研究将L基因克隆到pET-28a(+)原核表达质粒中,构建了重组表达质粒pET-28a-L,转化至大肠杆菌BL21中进行重组蛋白的诱导表达,所获得重组His-Lpro主要以包涵体形式存在,利用Ni-NTA柱纯化获得了高纯度的His-Lpro,将His-重组Lpro与弗氏佐剂混合乳化后免疫新西兰大白兔,制备了高效价的Lpro兔多克隆抗体血清.通过免疫荧光试验(IFA)、免疫印迹试验(WB)检测Lpro兔多克隆抗体血清的反应原性.结果显示,该多抗血清能够特异性识别FMDV感染BHK21细胞后表达的Lpro,表明本研究制备的Lpro多抗血清具有很好的反应原性,为深入研究Lpro功能及其拮抗宿主天然免疫的作用机理奠定了基础.

分类号： S852.65

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