基于重组E2蛋白的猪瘟病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙元

作者： 孙元;夏照和;梁冰冰;彭伍平;仇华吉

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;E2蛋白;密码子优化;杆状病毒表达系统;间接ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2008 年 38 卷 04 期

页码： 315-319

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据昆虫细胞密码子偏嗜性,对猪瘟病毒E2基因进行密码子优化,并利用昆虫杆状病毒表达系统进行了表达,表达水平约为野生型E2基因的3倍。将表达的重组E2蛋白纯化后作为ELISA包被抗原,建立了一种基于重组E2蛋白的间接ELISA方法,并对此方法的反应条件进行了优化。确定的ELISA最佳条件为:抗原包被浓度为2μg/mL,封闭液为10 g/L聚乙烯醇PBS溶液,被检血清1∶160稀释,辣根过氧化物酶标记的兔抗猪IgG(二抗)1∶5 000稀释。确定的阴性血清临界D450 nm值为0.30,阳性血清临界D450 nm值为0.35。将该ELISA方法与IDEXX公司生产的猪瘟病毒抗体检测试剂盒做相关比较,结果符合率为82.3%。表明,该方法可以用于猪瘟病毒抗体的检测。

分类号： S854.43

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