荸荠基因组DNA的提取及RAPD反应体系的建立(英文)
文献类型: 中文期刊
第一作者: 江文
作者: 陈丽娟;李杨瑞;杨丽涛
作者机构:
关键词: 荸荠;基因组DNA;提取;RAPD;反应体系
期刊名称: 广西农业科学
ISSN: 1002-8161
年卷期: 2009 年 40 卷 03 期
页码: 229-232
摘要: 以荸荠叶状茎为试验材料,采用改良的SDS法提取其基因组DNA,并对其RAPD反应体系进行优化,建立了荸荠的RAPD-PCR优化反应体系和程序。结果表明,提取的基因组DNA纯度和完整性较好,OD260/OD280值在1.8~2.0之间,DNA无降解现象,完全可以满足RAPD-PCR扩增要求。建立了荸荠RAPD反应体系:总体积为25μl,各有关成分的最佳浓度分别为25mmol/L Mg2+,1.0U Taq DNA聚合酶,0.2mmol/L dNTPs,1μmol/μl引物,1.5ng/μl DNA模板。PCR反应程序为:94℃预变性3min;94℃变性1min,37℃退火30s,72℃延伸60s,40个循环;最后72℃延伸10min。
分类号: S645.3
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