牛型布氏杆菌苹果酸脱氢酶单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 童永亮

作者： 童永亮;韩先干;孙晓庆;丁铲;胡青海;丁家波;王豪举;于圣青

作者机构：

关键词： 牛型布氏杆菌;苹果酸脱氢酶;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2012 年 06 期

页码： 596-600

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备牛型布氏杆菌(Brucella abortus)苹果酸脱氢酶(MDH)单克隆抗体,将牛型布氏杆菌A19菌株的MDH基因进行克隆和表达,表达产物被纯化后作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠。取免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经亚克隆和间接ELISA筛选,最终获得3株分泌牛型布氏杆菌MDH蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别被命名为C2、D5和F4。ELISA检测结果表明,3株杂交瘤细胞培养上清的抗体效价为1∶1 600～1∶3 200,小鼠腹水效价为1∶12 800～1∶25 600;Western-blot检测结果表明,3株单克隆抗体均能与牛型布氏杆菌MDH重组蛋白发生特异性反应。结果表明,本研究成功制备了牛型布氏杆菌MDH蛋白单克隆抗体,为基于MDH的布氏杆菌检测方法的建立奠定了基础。

分类号： S852.614

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