合浦珠母贝DNA的抽提和RAPD反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭奕惠

作者： 郭奕惠;黄桂菊;喻达辉

作者机构：

关键词： 合浦珠母贝;DNA提取;RAPD条件优化;PAGE银染

期刊名称： 南方水产

ISSN： 1673-2227

年卷期： 2006 年 2 卷 04 期

页码： 63-68

摘要： 分别从保存于-70℃和95%乙醇的合浦珠母贝组织提取总DNA。结果表明,乙醇保存标本用双蒸馏水预处理后所提的DNA与-70℃保存的标本所提的DNA质量均较好。用抽提的DNA为模板优化RAPD条件,得到适合于合浦珠母贝的RAPDPCR反应条件为:20μL反应体系中包括20ngDNA模板,1×PCRBuffer,0.1mmol·L-1dNTPs,2.5mmol·L-1MgCl2,0.2μmol·L-1引物,1UTaqDNA聚合酶。最佳退火温度40℃。PCR产物用非变性PAGE银染和琼脂糖EB染色检测所得到的主要带型相同,但PAGE能检测到更多的多态带。

分类号： S917.4

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