藏獒IFN-γ基因在毕赤酵母中的表达与抗病毒活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋世斌

作者： 宋世斌;何小兵;景志忠;陈国华

作者机构：

关键词： 藏獒IFN-γ;酵母表达;抗病毒活性

期刊名称： 中兽医医药杂志

ISSN： 1000-6354

年卷期： 2024 年 43 卷 005 期

页码： 1-6

摘要： 采用毕赤酵母表达系统表达藏獒γ-干扰素（Tibetan mastiff interferon gamma,TmIFN-γ）并分析其生物活性，为抗病毒生物制品的研发与临床应用奠定基础。将构建的TmIFN-γ的真核表达质粒pPIC9k-TmIFN-γ转化至毕赤酵母GS115细胞，用不同浓度的G418筛选得到多拷贝重组菌株；利用甲醇进行诱导表达，以镍层析柱纯化目的蛋白，对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定；通过CCK-8试验检测重组TmIFN-γ蛋白的细胞毒性作用，利用VSV-MDBK系统检测其抗病毒生物活性。结果显示，成功筛选得到高拷贝pPIC9k-TmIFN-γ重组转化毕赤酵母菌株，利用甲醇诱导可获得TmIFN-γ重组蛋白，该蛋白对细胞无毒性，具有显著抗病毒活性，其抗病毒生物效价为1.727×10～5IU/mL。本研究获得了具有抗病毒活性的TmIFN-γ，有助于进一步探索TmIFN-γ的功能和开发新型基因工程抗病毒药物。

分类号： S852.4

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