文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘丽锋1,2
作者： 刘丽锋1,2;宋艳红1,2;赵霞1;李刚1,2;周厚成1
作者机构：
关键词： 草莓;CRISPR/Cas9;FvPDS;基因编辑
期刊名称： 园艺学报
ISSN： 0513-353X
年卷期： 2025 年 52 卷 007 期
页码： 1687-1695
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase,PDS）是类胡萝卜素生物合成的关键酶，其编码的PDS基因参与并调控植物类胡萝卜素的累积，PDS基因突变会使植物产生肉眼可见的白化表型，常用来作为检测基因编辑成功与否的标记基因。选取森林草莓FvPDS基因作为靶标，利用CRISPR/Cas9系统构建双靶点基因编辑载体，农杆菌介导法稳定遗传转化森林草莓种质HLJ-005（红果）、HLJ-004（白果），通过TA克隆测序法分析基因编辑的类型。遗传转化HLJ-005约2 250块叶片外植体，筛选到具有卡那霉素抗性的植株147株，通过PCR鉴定，24株为阳性材料，阳性率为16.32%，最后测序获得了5株具有编辑的材料，编辑效率为20.83%；遗传转化HLJ-004约2 305块叶片外植体，获得具有卡那霉素抗性的植株234株，PCR检测为6株阳性材料，阳性率为2.56%，测序只有3株为具有编辑的材料，编辑效率为50%。两个编辑位点都产生了突变，分别是单碱基或多个碱基的缺失，但是这两份种质的突变类型不尽相同。结果表明，利用CRISPR/Cas9系统可以通过稳定表达，HLJ-004、HLJ-005两个森林草莓实现双靶点同时敲除，HLJ-004、HLJ-005可作为草莓基因编辑的遗传转化材料，并验证了适合草莓基因编辑的CRISPR/Cas9系统。
分类号：
S668.4
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