猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵慧君

作者： 赵慧君;赵旭阳;史西保;陈静;范小敏;司朝朝;王丽;李青梅;常晓博;李雪莹;付建蒙;徐雅甜;邓瑞广;张改平

作者机构：

关键词： PRRSV;nsp1α;多克隆抗体

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2019 年 47 卷 012 期

页码： 115-119,131

摘要： 以真核质粒pcDNA3.1-flag-nsp1α为模板,利用PCR扩增出nsp1α基因片段,构建原核重组载体pET32a-nsp1α,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态,1 mmol/L IPTG在37℃诱导表达6 h,成功获得以包涵体形式存在的重组蛋白,能够与小鼠抗His标签单克隆抗体反应;包涵体复性后作为抗原免疫新西兰大白兔,3次免疫后20 d获得兔多抗血清.通过间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光、免疫组化等试验获得了高效价的兔多抗血清,该血清能够特异性地识别真核质粒表达的nsp1α以及PRRSV BJ4株.该试验成功表达了pET32a-nsp1α重组蛋白,并制备了高效价、高特异性的兔抗nsp1α多克隆抗体.

分类号： S852.65+1

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