基于高分辨熔解分析的cry1I类基因的克隆、表达及活性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 赵灿

作者: 张春鸽;束长龙;孙冰;宋福平;高继国;张杰

作者机构:

关键词: 苏云金芽胞杆菌;高分辨熔解分析;cry1I;克隆;杀虫活性

期刊名称: 中国生物防治学报

ISSN: 2095-039X

年卷期: 2013 年 29 卷 01 期

页码: 68-73

收录情况: CSCD

摘要: 本研究将高分辨熔解分析(high resolution melting assay,HRMA)的方法应用于cry1I类基因的分型。根据已报道的cry1I类基因的保守区设计一对扩增片段为131 bp的通用鉴定引物,利用高分辨熔点仪对产物的熔解曲线进行分析。利用此方法对本实验室保存的标准菌株HD-12进行了cry1I类基因的鉴定,克隆到2个新型的cry1Ib和cry1Id基因,被Bt国际命名委员会分别正式命名为cry1Ib11和cry1Id2。这两种基因在E.coli Rosetta菌株中能正常表达81 kDa的蛋白。Cry1Ib11和Cry1Id2蛋白对小菜蛾Plutellaxylostella二龄幼虫和亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis初孵幼虫具有显著的杀虫活性,LC50分别为6.13μg.mL 1和6.10μg.mL 1及11.18μg.mL 1和1.43μg.mL 1。但对甜菜夜蛾Spodoptera exigua及鞘翅目的大猿叶甲Colaphellus bowringi均没有明显毒杀作用。高分辨溶解分析法为新型cry基因的快速、准确鉴定提供了有效的工具。

分类号: S476.11

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