黄瓜细菌性白枯病菌ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙艳秋

作者： 孙艳秋;赵奎华;刘长远;曹远银

作者机构：

关键词： 黄瓜细菌性白枯病菌;抗体;酶联免疫吸附分析

期刊名称： 沈阳农业大学学报

ISSN： 1000-1700

年卷期： 2012 年 43 卷 05 期

页码： 528-533

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以黄瓜细菌性白枯病菌胞内蛋白为免疫原,制备抗体,建立黄瓜细菌性白枯病菌ELISA检测方法。结果表明:测定纯化后抗体的效价为1∶4000,与黄瓜细菌性角斑病菌等26个菌株无交叉反应,特异性强;方阵试验测定抗原的最佳包被浓度为107cfu.mL-1,抗体的工作浓度为1∶2000;优化ELISA检测条件,确定抗体4℃过夜包被效果最好,选择5%的胎牛血清作为抗体的封闭液,抗体的最佳封闭时间为1.5h,抗体的最佳孵育时间为1.5h,最佳底物作用时间为10min;建立ELISA标准工作曲线,表明抗体的灵敏度为105cfu.mL-1。ELISA检测田间采集的白枯病病叶显示,抗体可与病叶提取液发生特异性反应,而与健康叶提取液呈阴性反应,由此可确定白枯病菌的存在与否。本方法可用于田间黄瓜细菌性白枯病快速检测,以及时指导病害防治。

分类号： S436.421.1

  • 相关文献

[1]黄瓜细菌性白枯病菌特异性抗体制备及其ELISA检测方法的建立. 孙艳秋,赵奎华,刘长远,曾远银. 2011

[2]快速检测黄瓜细菌性角斑病菌的间接ELISA法优化. 孙艳秋,赵奎华,刘长远,曹远银. 2014

[3]石房蛤毒素酶联免疫吸附测定方法的研究. 刘帅帅,朱兰兰,周德庆. 2011

[4]草鱼血清IgM蛋白的纯化及抗血清的制备. 丁炜东,曹丽萍,曹哲明. 2010

[5]ELISA在苏云金杆菌杀虫蛋白毒素检测中的应用及新进展. 吴瑞华,李国勋,冯书亮,王容燕,王金耀,曹伟平,杜立新,陈丹. 2007

[6]牛叠朊编码基因缺失突变体的构建及在大肠杆菌中的表达. 杨生海,殷宏,刘永生,马艳平,丁耀忠,孙彩琴,丁小丽,张杰. 2011

[7]贵州省猪戊型肝炎的血清学调查. 任荣清,张登祥,文正常,潘淑惠,代如信. 2009

[8]蛋鸡高致病性禽流感疫苗免疫程序的优化. 任荣清,汪德生,黄波,余波,李干洲. 2015

[9]猪口蹄疫○型合成肽疫苗诱导的免疫抗体的监测. 李儒曙,伍时达,冷和平,赵庆文,游淼. 2012

[10]莱克多巴胺人工免疫原合成及抗体特性. 张海棠,王自良,王艳荣,邓瑞广. 2008

[11]膜分离法纯化浓缩猪伪狂犬病疫苗毒的效果. 武桂梅,王振辉,张秀峰,张恒军,刘军,吕礼良. 2010

[12]鸡痘病毒抗体在鹌鹑体内的消长规律. 金明兰,侯继波,南文龙,鲁会军,马鸣潇,郑敏,金宁一. 2011

[13]3种ELISA法定量检测转crylAc基因水稻CrylAc蛋白的比较研究. 秦崇涛,陈在杰,苏军,王锋. 2003

[14]猪血清中牛病毒性腹泻病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用. 曾亮明,徐磊,王玉玲,陈先进,林伯全. 2014

[15]TOLL样受体抗体对鼠疟疾病理进程的影响. 孙斐,许兵红,杨小林,张佑宏,刘世国. 2012

[16]农药残留免疫分析方法及其应用研究进展. 黎其万,潘灿平. 2004

[17]温州蜜柑萎缩病毒小外壳蛋白基因克隆与原核表达及其抗体制备. 武改霞,李婷婷,孙现超,青玲. 2012

[18]"906"免疫增强剂对鸡新城疫H1抗效价的影响. 贺澄日,高瑞萍. 1997

[19]饲料及畜禽产品中霉菌毒素快速检测技术研究进展. 董国良,彭大鹏,韩肖亚,刘振利,袁宗辉. 2016

[20]检测坦布苏病毒病抗体NS1-ELISA方法的建立与初步应用. 谢星星,李祥瑞,李银,赵冬敏,黄欣梅,韩凯凯,刘宇卓,游园. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序