文献类型： 中文期刊
第一作者： 文 博霖
作者： 文 博霖;万 敏;胡 建军;王 克秀;景 晟林;王 心悦;朱 博;唐 铭霞;李 兵;何 卫;曾 子贤
作者机构：
关键词： 马铃薯;川芋50;根癌农杆菌;遗传转化;基因编辑;CRISPR/Cas9
期刊名称：
ISSN： 1002-5464
年卷期： 2025 年 41 卷 4 期
页码： 88-97
摘要： 【目的】构建马铃薯川芋50的遗传转化体系和基因编辑体系。【方法】以四川省主导品种川芋50无菌脱毒组培苗茎段和叶片为外植体，用农杆菌介导法将含有植物敲除载体质粒pJCV55-StU6-200-StUBI10-T#01转化马铃薯外植体，分析4种不同植物激素配比的培养基体系对马铃薯愈伤组织诱导和分化的影响，探究川芋50的基因编辑、阳性植株鉴定方法。【结果】1）最适马铃薯川芋50遗传转化的培养基体系为B体系。茎段和叶片预培养及愈伤组织诱导的培养基配方分别为：MS 基础盐+20 g/L蔗糖+1 mL/L 1 000× N&N维生素（1 000× Nitsch&Nitsch Vitamin Solution, 1 000× N&N维生素）+1.0 mg/L TZR（trans-zeatin-riboside, TZR）+0.027 8 mg/L GA3（gibberellin A3, GA3）+0.02 mg/L NAA（1-naphthaleneacetic acid, NAA）+2.0 g/L Phytagel和MS基础盐+20 g/L蔗糖+1 mL/L 1 000× N&N维生素+0.5 mg/L TZR+2.5 mg/L IAA（indole acetic acid, IAA）+2.0 g/L Phytagel，愈伤诱导率分别为93%和88%。愈伤组织分化的培养基为：MS基础盐+20 g/L蔗糖+1 mL/L 1 000× N&N维生素+2.0 mg/L TZR+10 mg/L GA3+2.0 g/L Phytagel；2）证明了二次生根筛选法可准确鉴定马铃薯转基因阳性植株，准确率100%；3）建立了针对川芋50的农杆菌介导CRISPR/Cas9基因编辑体系，编辑率63%。【结论】通过对愈伤再生过程中各个影响因素进行试验以及利用农杆菌介导的CRISPR/Cas9技术进行编辑，建立了马铃薯川芋50的遗传转化体系和基因编辑体系。
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