旋毛虫丝氨酸蛋白酶基因的克隆与分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李莲瑞

作者: 李莲瑞;付宝权;卢强;韩文瑜;刘明远

作者机构:

关键词: 旋毛虫;丝氨酸蛋白酶基因;克隆

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2008 年 38 卷 03 期

页码: 200-205

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以旋毛虫感染猪血清为抗体探针,对旋毛虫3日龄成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的阳性克隆进行测序,用分子生物学软件对所得cDNA序列进行了分析。序列分析结果显示,阳性克隆Zh68 cD-NA全长为1 372 bp,含有1个1 287 bp的完整的开放阅读框架,编码由429个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为47.5 ku,等电点为8.45。SMART分析表明,1~18位氨基酸为信号肽序列,37~277位氨基酸为典型的丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶类结构域,其中His88、Asp142、Ser233为催化中心的3个主要氨基酸残基,78~80位氨基酸为N-糖基化位点(NCS),另外还有6个保守的Cys形成二硫键。BLASTn同源性分析表明,与其他生物丝氨酸蛋白酶的基因序列无明显的同源性,为1个新的cDNA分子。BLASTp蛋白质同源性分析表明,与丝氨酸蛋白酶的同源性为30%左右。Southern-blot杂交表明,此基因在旋毛虫基因组中属于多基因家族,具有基因多态性。cDNA的PCR结果表明,此基因在旋毛虫肌幼虫、新生幼虫及成虫期均有表达。

分类号: S852.7

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