CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邹修平

作者： 邹修平;范迪;彭爱红;何永睿;许兰珍;雷天刚;姚利晓;李强;罗克明;陈善春

作者机构：

关键词： 柑橘;CRISPR/Cas9系统;CsLOB1;多位点;基因编辑

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 337-344

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑。通过在CsLOB1启动子的EBEPthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别对CsLOB1启动子同时进行2个位点和3个位点的编辑。测序结果表明pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites的基因编辑效率分别为64.7%和80.0%,突变体植株在2个sgRNA之间发生了DNA片段的删除。进一步的分析发现,不同的sgRNA具有不同的突变效率,其差异是由于不同的sgRNA对CsLOB1-识别和结合能力的差异造成的。本结果表明对CsLOB1启动子进行多位点编辑可以获得删除较大DNA片段的突变体。

分类号： S666

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