玉米根腐病菌麦根腐平脐蠕孢的LAMP检测方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘树森

作者： 刘树森;郭宁;孙华;马红霞;张海剑;石洁

作者机构：

关键词： 玉米根腐病;麦根腐平脐蠕孢;Brn1基因;环介导等温扩增;检测方法

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2023 年 001 期

页码： 162-167

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 麦根腐平脐蠕孢是玉米根腐病的重要病原菌之一，旨为建立一种基于环介导等温扩增技术（LAMP）的麦根腐平脐蠕孢快速检测方法。首先，根据麦根腐平脐蠕孢参与黑色素生物合成途径的Brn1基因部分序列设计了一套LAMP检测引物；然后，针对该引物组筛选了其最佳反应温度，检测了LAMP反应的特异性和灵敏度，并以人工接种麦根腐平脐蠕孢的玉米根腐病病株为样本评价了LAMP检测方法的效果。结果表明，本研究设计的引物组在61～68℃条件下均能实现对靶标基因的扩增，其中以66℃为最佳反应温度；在特异性检测中，引物组能从10种分离自玉米根腐病样本的主要病原真菌DNA中特异性地检测出麦根腐平脐蠕孢；在灵敏度检测中，对携带靶基因Brn1的质粒DNA最低检测限是10 copies/μL,在此检测限浓度下，25 min左右即可实现扩增；在对玉米根腐病样本检测中，在1 pg/μL的玉米根组织DNA中即可检测出麦根腐平脐蠕孢。建立的麦根腐平脐蠕孢LAMP检测方法具有较强的特异性和较高的灵敏度。

分类号： S435.131

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