香蕉束顶病毒海口分离物Rb蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗血清制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冯团诚

作者： 冯团诚;余乃通;刘志昕

作者机构：

关键词： 香蕉束顶病毒;Rb蛋白;原核表达;抗血清;间接ELISA

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2010 年 31 卷 08 期

页码： 1239-1243

收录情况： CSCD

摘要： 应用PCR方法从感染香蕉束顶病毒的香蕉植株幼嫩假茎和叶片总DNA中克隆了Rb(Rb-binding-like protein)基因的编码区,将其插入原核表达载体pET-28b中构建重组质粒pET28b-Rb。转化重组质粒的E.coli BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,表达产物大小为22.6ku,且主要以包涵体形式稳定表达。目的蛋白经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化后免疫家兔并获得抗血清。Western blot检测结果表明,抗血清与诱导表达的BBTV编码Rb蛋白发生特异性反应。间接ELISA法测定的抗血清效价大于1:250000。用抗血清对感病香蕉和健康香蕉进行检测,结果表明,抗血清对感病香蕉有很高特异性,最佳工作浓度为1:1500。

分类号： S436.68

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