猪小肠上皮细胞酵母双杂交cDNA文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李慧春

作者： 李慧春;陈鹏飞;李先斌;丁思嘉;王康;张文超;杨德强;李林;徐晶晶;虞凌雪;姜一峰;高飞;于海;童光志;周艳君

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;猪小肠上皮细胞;酵母双杂交cDNA文库

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2019 年 27 卷 002 期

页码： 19-24

摘要： 猪小肠上皮细胞(intestinal epithelial cell,IECs)是猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)在宿主体内感染的靶细胞,为了研究PEDV在体内与宿主细胞蛋白之间的互作关系以便于揭示其致病机理,本研究以IECs为研究对象,提取了IECs的总RNA,利用SMART技术经过反转录、扩增和纯化获得双链cDNAs后,将其与pGADT7-Rec和carrier DNA共同转化至酵母Y187菌株,进行选择性培养基(SD/-Leu)筛选以及文库容量及质量的鉴定.结果显示,本研究构建的IECs-cDNA文库其库容量为1.3×108 pfu/mL,插入cDNA片段长度为250~2500 bp,文库阳性率达100%.本研究结果表明构建的IECs-cDNA文库具有较好的多态性,为后续研究PEDV与宿主细胞蛋白之间的互作关系提供了有力支持.

分类号： S852.659.6

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